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Il est donc préférable pour notre étude de faire nos tests sur des sangs humains. La Figure 3-4 représente les valeurs d'HE 50 obtenues avec trois sangs humains différents possédant
des hématocrites de 47. 3, 44. 9 et 46. 9% en présence de saponines. Gélose au sang, hémolyse et réactions hémolytiques | Wechsel. Sang 1
Ht=47. 3%
HE 50 (µM)
Sang 2
Ht=44. 9%
Sang 3
Ht=46. 9%
Saponine 15, 8 15, 1 13, 3
Figure 3-4: Tableau récapitulatif des HE 50 obtenues avec la saponine Ultra Dry sur sang humain
Une importante variabilité des valeurs est observée. Cela peut s'expliquer par une variabilité
biologique, en effet en fonction du sang utilisé la concentration de tensioactifs pour lyser 50% des GR
varie [10, 11]. Des expériences ont été réalisées en faisant varier l'hématocrite d'un sang humain
(Figure 3-5). Figure 3-5: Variation de l'hématocrite d'un sang humain en fonction de la concentration en saponine
Lorsque l'hématocrite diminue, c'est-à-dire lorsque le nombre de GR diminue, les HE 50 obtenues
augmentent. En effet, pour chaque dilution de notre échantillon de sang par du plasma, la quantité de
plasma augmente.
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Tous les autres tests annulés peuvent être trouvés sous l'onglet des tests annulés dans le DPI. Cela pourrait changer avec l'introduction d'EPIC. Un médecin prescripteur peut demander qu'un résultat soit affiché indépendamment de l'interférence en appelant le laboratoire. Ce résultat sera affiché avec un avertissement. Les questions peuvent être adressées à R. Feld (6-1759).
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Tests biochimiques courants affectés par un échantillon hémolysé. Augmentation
Diminution
Potassium (K+)
Troponine T
Lactate. Déshydrogénase (LDH)
Haptoglobine
SGOT/AST
Bilirubine
SGPT/ALT
Amylase
Créatine Kinase (CK)
Bicarbonate (HCO3-)
Fer
Phosphate (PO4-)
Protéines totales
Albumine
Magnésium (Mg++)
Calcium (Ca++)
Phosphatase alcaline (ALP)
Lipémie
La lipémie est la présence d'un excès de lipides ou de graisses dans le sang. Ce phénomène donne au plasma ou au sérum un aspect trouble ou « laiteux ». Échantillon de sang hémolyse pour. Causes de la lipémie
La lipémie est la concentration accrue de lipoprotéines riches en triglycérides dans le sang, ce qui entraîne l'aspect trouble/turbide du sérum ou du plasma. Comme les lipoprotéines varient en taille, elles ne contribuent pas toutes de la même manière à la turbidité. Les plus grosses particules, les chylomicrons ont le plus grand potentiel pour causer la turbidité de l'échantillon. Mécanisme d'interférences
Les effets de diffusion de la lumière peuvent augmenter les absorbances pendant les réactions au point final et les réactions sans coupure pour certains analytes.
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En effet, au-cours de ces laps de temps, l'action du tensio-actif bien que ralentie par la trempe à 4°C,
se poursuit. Un nouveau protocole a donc été mise au point. 3. 2. Mise au point d'un nouveau protocole hémolytique
3. 1. Échantillon de sang hémolyse st. Choix du matériel biologique
Le suivi en parallèle de la lyse des globules blancs et celle des globules rouges rend impossible la
poursuite de l'étude sur des hématies de mouton. L'utilisation des hématies de mouton permet
d'obtenir un classement rapide du pouvoir érythrolytique des tensioactifs. Cependant les érythrocytes
de mouton et humain ne réagissent pas de la même façon face à la lyse [5]. Les érythrocytes de
moutons sembleraient plus fragiles à la lyse osmotique que les érythrocytes humains [6]. Il existe
également des différences morphologiques avec un volume globulaire moyen de 30µm 3 pour le GR de
mouton comparé à 90µm 3 pour le GR humain [7]. Des différences apparaissent également dans la
composition membranaire soit par exemple la présence de 32, 7% de phosphatidyl éthanolamine
contre 27% et 52, 3% de sphingomyéline contre 26%, chez le GR de mouton et humain
respectivement [8, 9].
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Tests biochimiques courants affectés par un échantillon ictérique..
Cholestérol
Triglycéride
Créatinine
Lipase
Acide urique
GGT.
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Ainsi, il peut être utilisé pour la culture primaire, cest-à-dire comme moyen dobtenir une gamme de croissance bactérienne aussi large que possible à partir dun échantillon. Cependant, il nest généralement pas utilisé à cette fin en raison du coût du support. Dautres géloses moins chères feront la même chose. La gélose au sang convient uniquement à la détermination de lhémolyse. Lhémolyse est la dégradation de la membrane des globules rouges par une protéine bactérienne appelée hémolysine, qui provoque la libération dhémoglobine du sang rouge cellule. Tests affectés par les échantillons hémolysés, lipémiques et ictériques et leur mécanisme | LaboratoryInfo.com | Saayarelo. De nombreux types de bactéries possèdent des protéines hémolytiques. On pense que ces protéines agissent en sintégrant dans la membrane du globule rouge et en perforant un trou à travers la membrane ou en perturbant la structure de la membrane dune autre manière. Les détails moléculaires exacts de laction de lhémolysine ne sont toujours pas résolus. Le sang utilisé dans la gélose est également traité au préalable pour éliminer une molécule appelée fibrine, qui participe à la coagulation du sang.
Le sang est constitué de cellules et de plasma (ou sérum), un liquide qui est normalement de couleur jaune paille et transparent. Les appareils qui analysent les spécimens de sérum (tests de biochimie) surveillent trois aspects du sérum: la lipémie, l'indice d'ictère et l'indice d'hémolyse. L'indice d'hémolyse est une mesure de la couleur rouge du sérum. Cette couleur est normalement due quasi exclusivement à la présence d'hémoglobine provenant de la rupture de la membrane des globules rouges. L'indice d'hémolyse est exprimé en nombre de « plus » (de zéro à ++++). Un indice d'hémolyse de zéro est normal. Un résultat non négatif (+ à ++++) indique une concentration anormale d'hémoglobine qui peut être due à des causes pathologiques (maladies hémolytiques), mais reflète aussi très souvent une anomalie de préparation des spécimens. Échantillon de sang hémolyse sur. Chez certains patients, la membrane des globules rouges est plus fragile et un nombre anormalement élevé de globules rouges se brisent au moment du prélèvement (prélèvement traumatique, en particulier par microméthode chez le jeune enfant) ou pendant le processus de stabilisation du spécimen par centrifugation.