Le surnageant est obtenu
après une centrifugation de 15 min à 2500 g (Thomas et Hilker 2000). Les nitrates sont
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ensuite dosés selon la méthode utilisée pour le dosage de l'azote minéral des sols, par
spectrophotométrie, avec un analyseur automatisé de type Skalar. III. 7 Extraction et dosage des acides aminés
L'extraction se fait sur 20 mg de matière sèche en poudre, en deux incubations successives
de 30 min, avec deux fois 750 µL d'éthanol à 70%. Les surnageants sont récupérés après
15 min de centrifugation à 10000 g. Les surnageants des deux incubations successives sont
réunis. Les acides aminés sont dosés à partir d'un réactif de ninhydrine, selon la méthode de
Moore et Stein (1954). L'absorbance du composé bleu violet formé est mesurée au
spectrophotomètre, à 570 nm. La gamme étalon est réalisée avec une solution de leucine. Les
résultats sont exprimés en µmol par g de matière sèche. III. 8 Extraction et dosage des chlorophylles
Les teneurs en chlorophylles a et b sont évaluées selon la méthode de Lichtenthaler (1987).
Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie Principe
protocoles de TP: Biochimie et nutrition
Description
ANALYSE D'UN PEPTIDE: Dosage de l'azote total du peptide par la méthode de Kjeldahl, recherche et dosage des acides aminés aromatiques par spectrophotométrie U. V., séparation par électrophorèse des acides aminés d'un hydrolysat chlorhydrique du peptide, chromatographie en couche mince des acides aminés de différents hydrolysats du peptide. DOSAGE DE LA VITAMINE C dans les fruits, jus de fruit et pomme de terre (crue et cuite) (DCPIP)
DOSAGES DES LIPIDES ET DU CHOLESTEROL DANS LE LAIT (colorimétrie). DOSAGE DU CALCIUM DANS LE LAIT PAR COMPLEXOMÉTRIE minéralisation sulfo-nitrique, Dosage des ions Ca2+ dans un minéralisat de lait. ETUDE DE LA POLYPHENOL OXYDASE DE LA POMME: extraction de l'enzyme, cinétique. DÉTERMINATION DE LA STRUCTURE D'UN PHOSPHO-AMINOLIPIDE: Dosage des phosphates (Briggs), détermination des structures de l'aminoalcool, des acides gras. DOSAGE DU LACTOSE DU LAIT: Méthode de Potterat-Eschmann. DÉTERMINATION DE LA COMPOSITION EN GLUCIDES D'UN JUS DE FRUIT: extraction, chromatographie, dosages d'oxydoréduction, polarimétrie.
Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie Cours
Le dosage est réalisé à partir d'une prise
d'essai de 200 µL de l'extrait de sucres solubles, complétée à 1 mL avec de l'eau distillée. Immédiatement après l'ajout de 500 µL du réactif au DNS, une incubation de 5 min à 100°C
est réalisée. Après 5 min de centrifugation à 5000 g, la lecture de la densité optique se fait à
530 nm sur une aliquote du surnageant diluée à l'eau distillée. La gamme étalon est réalisée
dans les mêmes conditions de dilution avec une solution de glucose. Les résultats sont
exprimés en mmol par g de matière sèche. III. 5 Teneur en carbone organique total (COT)
Les analyses sont réalisées avec un analyseur de carbone (COT mètre, Shimadzu) à partir
de 15 à 20 mg de poudre sèche qui est carbonisée à 200°C (méthode SSM-TC). L'appareil
donne directement la masse de carbone organique total exprimée en pourcentage de la masse
sèche de l'échantillon. Pour chaque échantillon deux répétitions sont effectuées. III. 6 Extraction et dosage des nitrates dans les racines
L'extraction des nitrates est réalisée à partir de 50 à 200 mg de poudre fine végétale mis en
incubation dans 5 mL d'eau déminéralisée, pendant 1 heure à 45°C.
Dosage Des Glucides Par Spectrophotometrie
Une fois refroidi, on ajoute 1, 5 mL de réactif d'anthrone à 0, 2% (m/m) dans H2SO4
concentré. Après 20 min d'incubation à 40°C, la lecture de la densité optique se fait à 620 nm. La gamme étalon est réalisée avec une solution de saccharose. Pour chaque extrait, 3 essais
sont réalisés. Les résultats sont ensuite exprimés en mg par g de matière sèche. III. 4 Dosage des sucres réducteurs
Les sucres réducteurs sont dosés avec un réactif à l'acide 3, 5-Dinitrosalycilique (DNS), par
une méthode colorimétrique (Miller 1959). C'est une réaction d'oxydoréduction non
stœchiométrique qui permet de quantifier les sucres réducteurs. En milieu alcalin et à chaud,
l'acide 3, 5-dinitrosalicylique jaune est réduit par les oses réducteurs en acide 3-amino
5-nitrosalicylique rouge orangé. Le réactif au DNS est une solution d'acide 3, 5-Dinitrosalycilique 40 mM, de NaOH
400 mM et de tartrate double de K-Na 1 M. Cette solution est préparée en solubilisant
séparément le DNS et le NaOH. Le tartrate de K-Na est ensuite ajouté au mélange qui est
chauffé à 50°C pour en faciliter la solubilisation.
Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie Un
Un dosage colorimétrique est un type de dosage possible lorsqu'une réaction chimique donne des produits colorés et si l'intensité de la coloration est proportionnelle à la concentration de l'élément à doser. Les dosages colorimétriques s'appuient sur la loi de Beer-Lambert. Un dosage colorimétrique est également possible en utilisant des indicateurs colorés tels que l'hélianthine, la phénolphtaléine, le vert de bromocrésol qui vont se colorer par exemple à pH différents et de ce fait, vont pouvoir indiquer quand on atteint le point d'équivalence. On parle alors aussi de titrage colorimétrique. Loi de Beer-lambert [ modifier | modifier le code]
La forme utilisée est la suivante:
A: absorbance de la solution sans unité
ε: coefficient d'extinction molaire en L×mol -1 ×cm -1 (parfois noté avec un ξ)
l: longueur de cuve traversée par la lumière en cm
C: concentration molaire en mol×L -1. La mesure de l' absorbance est donnée par un spectrophotomètre qui mesure la densité optique. Plus une solution est colorée, plus la lumière a du mal à traverser, donc plus l'absorbance de la solution augmente.
V ermander Ste ve 2BCC C Manipulation n°7: Dosage du glucose Co équipier: Desart Adrien Siol i Nanouchk a Date de r éalisation de la ma nipulation: 08/12/2017 Prof esseur: M me Motte La b or atoi re de C hi mi e Cl i ni qu e Dosag e du glucose Pag e | 1 N° étudiant: 56 N° manipulation: 7 Co te: