Nous essayerons d'en déterminer les facteurs qui peuvent influencer l'efficacité d'une enzyme. On va étudier tout d'abord l'hydrolyse de l'amidon (Glucide), puis l'hydrolyse des lipides, et enfin l'hydrolyse des protéines. [... ] [... Les hydrolyses enzymatiques. ] On utilisera donc dans cette expérience: de la margarine, qui nous servira à préparer l'émulsion de lipides, une solution d'agar-agar qui gélifiera dans la boite de Pétri le mélange empois d'amidon-margarine émulsionnée. L'étuve réglée à 40 nous servira à l'incubation de la préparation, après ajout sur une partie de la boite de Pétri la solution de pancréatine contenant les lipases. On mettra ici en évidence la présence d'acides gras par une solution de sulfate de cuivre, après incubation. Là où il y aura la couleur bleue voudra dire qu'il y a bien eu saponification, et donc hydrolyse des lipides. ] ( La coloration que nous obtiendrons sera le témoin de l'absence de liaisons peptidiques. - Tube 2: On introduit une petite quantité d'urée. On chauffe jusqu'à fusion puis on maintient cette température quelques instants.
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Une réflexion sur ces données et sur la nécessité de les trier avant de les exploiter est entamée. Pour observer l'évolution de la concentration en amidon, un graphique de la luminance en fonction du temps est construit. Hydrolyse enzymatique de l'amidon et température - rvsvt. Remarque: un test à la liqueur de Fehling pour chacune des conditions au t0 et au t30min peut être présenté aux élèves afin de mettre en évidence l'apparition de sucres simples lors de cette réaction enzymatique. Consigne
Démontrer expérimentalement le rôle des protéines enzymatiques dans la réaction d'hydrolyse des glucides complexes en glucides simples assimilables par l'intestin. Vous porterez une attention particulière à la récolte des données en ayant une réflexion quant aux conditions nécessaires pour que celles-ci soit exploitables. Supports
Fiche activité élève
Fiche protocole
Fiche technique Mesurim et ON Color Measure
Fiche laboratoire pour professeur
Tableur collaboratif
Productions élèves
exemple 1
exemple 2
Bilan
La mesure de la concentration par colorimétrie avec smartphone motive les élèves car ils obtiennent des données avec un appareil qu'ils utilisent quotidiennement.
Il y a 12 fragments de chaînes
Comment ces fragments sont-ils disposés dans le feuillet? Les différents fragments en feuillet sont parallèles
Est-ce une structure en feuillet " pure "? ;
Non il y a des coudes. A quoi correspond la couleur rouge? Combien y en a-t-il? Ce sont les parties en hélice, il y en a 11 dans la molécule. A quoi correspond la couleur jaune? Combien y en a-t-il? Ce sont les parties en feuillets, il y en a 12 dans cette enzyme. A quoi correspondent les autres couleurs? Les autres parties sont celles qui ne sont ni en hélice ni en feuillet, elles forment souvent des coudes. 3. La structure tertiaire de la protéine
Combien y a-t-il d'atomes de soufre
Il y a 5 atomes de Soufre. Participent-ils tous à des ponts disulfures? Il n'y en a que 2 qui participent à un pont disulfure. Quels autres facteurs de réalisation d'une structure tertiaire connaissez-vous? Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction 1. Les liaisons hydrogène (comme dans la molécule d'ADN)
Faire tourner la molécule: Que remarquez-vous? Nature de cet élément?
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Résumé du document Nous sommes des organismes hétérotrophes, c'est-à-dire que nous consommons des matières organiques afin de pouvoir nous développer et survivre. Ces matières sont constituées d'éléments trop « gros » et donc non assimilables directement par les cellules. C'est pour cela que les enzymes sont essentielles dans la phase chimique de la digestion qui transforme les macromolécules en nutriments. Notre digestion est progressive: - Les gros aliments simples sont attaqués à plusieurs niveaux: L'amidon par la salive puis par le suc pancréatique, Les protéines par le suc gastrique puis par le suc pancréatique. - Les petits aliments simples sont tous digérés dans l'intestin grêle. - Dans l'intestin grêle, tous les aliments sont transformés en nutriments: Glucides: glucides simples (glucose, galactose, fructose,... Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase corrections. ) Protéines: acides aminés Lipides: acides gras, glycérol, lipides partiellement hydrolysés [... ] B) Hydrolyse enzymatique des lipides Dans cette expérience, on met une émulsion de lipides en présence de lipases contenus dans une solution pancréatique.
Le temps de pause dépend de l'éclairement donc pour qu'il reste constant, il faudra faire les captures dans un laps de temps court.
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Si mon hypothèse est validée, alors les sucres réducteurs seront présents uniquement dans le tube avec l'amidon. Si les sucres réducteurs apparaisent dans plusieurs tubes, alors c'est que la glycosidase n'est pas spécifique. Etape 2: Mettre en œuvre un protocole de résolution pour obtenir des résultats exploitables. Tube
1
2
3
4
5
6
Substrat 1 mL
amidon
glycogène
Saccharose
Solution de glycosidase
1 mL
0 mL
Eau dsitillée
Les tubes sont laissés au bain marie à37°C pendant 5 minutes, on réalise ensuite une recherche de sucres réducteurs avec un test àla liqueur de Fehling. En présence d'un sucre réducteur, il se forme un précipité rouge brique. Etape 3: Présenter les résultats pour les communiquer. Tube n°
Résultat du test
à la
liqueur de Fehling
Un précipité rouge brique se forme avec les tubes 1 et 2; il y a donc apparition d'un sucre réducteur dans les tubes n°1 avec l'amidon et n°2 avec le glycogène. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction orthographique. Etape 4: Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème. L'enzyme catalyse l'hydrolyse de l'amidon et du glycogène; elle n'est donc pas spécifique.
Quelle est la forme de cette enzyme? Cette enzyme a une forme de pelote ( forme globulaire)
Combien de groupements (AA)? Il y a 307 AA dans cette enzyme. 1. La structure primaire de la protéine
Quelle est la disposition des acides aminés? succession linéaire d'acides aminés reliés entre eux par des liaisons peptidiques. Quel est le nom du premier acide aminé? Il porte le NH2 terminal, c'est l'Alanine. Quel est le nom du dernier acide aminé? Il porte le COOH terminal, c'est l'Asparagine. Quelle est la séquence des 5 premiers acides aminés? [Biochimie] TP hydrolyse de l'amidon. ALA-ARG-SER-THR-ASN
Quels sont les atomes qu'on retrouve dans tous les acides aminés
C, H, O, et N
Quels sont les atomes qui ne sont présents que sur certains acides aminés? S comme par exemple la CYS
2. La structure secondaire de la protéine
Combien d'acides aminés dans cette chaîne? Combien de tours d'hélice? Combien d'acides aminés par tour d'hélice? Il ya 3 ou 4 AA par tour d'hélice. Combien d'acides aminés dans cette chaîne en feuillet? Combien de fragments de chaînes composent ce feuillet?
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01/06/2022
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