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21/09/2009, 18h33
#1
Sun28
TP hydrolyse de l'amidon
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Bonjour,
j'ai fait un tp la semaine dernier sur lhydrolyse acide et enzymatique
de l'amidon! cependant je me pose quelque question! tout d'abord je dois calculer la concentration rn amidon dans la
solution de depart en teant compte de la dilution par ajout dhcl ou de
je faire intervenir les propre concentrations de ces
derniers (de lacide ou de l'enzyme) ou dois simplement me servir de l
a relation c0v0=c1v1? en sachant que sans la dilution donc c0=10
g/l.....? Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction pour. cette question me bloque pas mal enfaite.... Puis une question qui peut paraitre bete, peut on dire que lhydrolyse de l'midon est totale avec lenzyme si l'on otient a la fin du maltose et non du glucose? vous pouviez m'aider!!!! merci encore de votre aide!!!! -----
29/10/2009, 14h33
#2
Merlinette86
Re: TP hydrolyse de l'amidon
je ne comprend pas ton soucis.. Tu dois calculer la concentration de l'amidon dans ton tube sachant que tu as mis x mL de solution d'amidon à 10 grammes par litre c'est ca?
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Digestion de l'amidon par l'amylase salivaire Objectif: Découvrir le mode d'action d'une enzyme hydrolysante: l'amylase Définition: une enzyme est une protéine qui facilite les réactions chimiques sans participer ni aux réactifs, ni aux produits Préparation: Solution d'empois d'amidon à 5% Solution d'amylase salivaire: - Quelques millilitres Salive diluée deux fois d'un des deux binômes o Il est important de noter que seule la personne ayant salivée manipule sa propre salive. Matériel par binôme: - Un bain-marie - Un portoir avec 4 tubes - Eau distillée (pour les témoins négatifs) - Plaques de coloration - Eau iodée - Liqueur de Féhling - Une réserve de chacune des 2 solutions - Pipettes - Un stylo feutre - Un chronomètre Protocole: - Dans le tube 1 verser 10mL d'empois d'amidon et 2 mL de solution d'amylase salivaire. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction sur. Agiter. - Dans le tube 2 verser 10mL d'eau distillée et 2 mL de solution d'amylase salivaire. - Identifier a l'aide d'un feutre chaque compte goutte « 1 » et « 2 » que vous aller utiliser à chaque prélèvement.
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Si mon hypothèse est validée, alors les sucres réducteurs seront présents uniquement dans le tube avec l'amidon. Si les sucres réducteurs apparaisent dans plusieurs tubes, alors c'est que la glycosidase n'est pas spécifique. Etape 2: Mettre en œuvre un protocole de résolution pour obtenir des résultats exploitables. Tube
1
2
3
4
5
6
Substrat 1 mL
amidon
glycogène
Saccharose
Solution de glycosidase
1 mL
0 mL
Eau dsitillée
Les tubes sont laissés au bain marie à37°C pendant 5 minutes, on réalise ensuite une recherche de sucres réducteurs avec un test àla liqueur de Fehling. En présence d'un sucre réducteur, il se forme un précipité rouge brique. Etape 3: Présenter les résultats pour les communiquer. Tube n°
Résultat du test
à la
liqueur de Fehling
Un précipité rouge brique se forme avec les tubes 1 et 2; il y a donc apparition d'un sucre réducteur dans les tubes n°1 avec l'amidon et n°2 avec le glycogène. SVT Correction du TP n°1: ETUDE DE LA SPECIFICITE DES ENZYMES DIGESTIVES. Etape 4: Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème. L'enzyme catalyse l'hydrolyse de l'amidon et du glycogène; elle n'est donc pas spécifique.
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Alors que pour le tube 2ne contenant pas d'amylase, la couleur aura plutôt tendance à stagner. Je peux donc conclure que l'amylase a une action sur l'amidon. En effet, l'amidondisparait au cours du réaction enzymatique est alors une transformation, elle permet de « découper » des sucres liés, amidon en sucres libres. |
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L'atome de ZINC se trouve également au niveau du site actif
Trois AA appartiennent au site catalytique proprement dit: HIS69, GLU72 et HIS196
Trois AA appartiennent au site de fixation: ARG145, TYR248 et GLU270
Mettre en évidence les AA du site actif et ceux du substrat
Le substrat en vert et les acides aminés du site actif, remarquez l'atome de zinc!
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Mesurim ou ON Color Measure (avec fiche méthode) ou Pixel Picker
Les logiciels permettent de déterminer la colorimétrie du milieu et d'en déduire la luminance, proportionnelle à la concentration d'amidon dans le milieu. Les limites des outils sont la sensibilité des capteurs photos des smartphones et notamment dans les conditions d'utilisation de ceux-ci (la lumière doit être homogène et constante)
Présentation de la séance - TP
Organisation
Les élèves prennent connaissance des différents types de glucides qui existent afin de comprendre le principe et les acteurs des réactions chimiques impliquées dans la digestion. Ils mettent alors au point une stratégie pour pouvoir démontrer l'action de l' α- amylase sur l'amidon. Hydrolyse enzymatique de l'amidon et température - rvsvt. Ils réalisent ensuite la manipulation proposée: mise en évidence de l'action de l' α- amylase sur l'amidon par la mesure de la colorimétrie du milieu testé en présence d'eau iodée ainsi que le test à la liqueur de Fehling. Un fichier tableur est à disposition des élèves, ils y recensent les données qu'ils ont obtenues.
Il s'agit vraisemblablement d'une amylase. Remarque: Les amylases hydrolysent les liaisons alpha 1-4 qui relient les molécules de glucose tant dans la molécule d'amidon que dans celle de glycogène.