Résumé du document 1/ Dans ce TP, nous avons analysé du pâté de campagne et du camembert. Ces deux aliments sont composés d'eau, de protéines, de lipides, de glucides, de minéraux et de vitamines. Nous voulons ici déterminer la teneur en protéines de ces produits. 2/ Tout d'abord, il faut minéraliser la matière organique pour transformer l'azote organique qui se trouvait dans les protéines en azote minéral. Cela se fait à chaud, en présence d'acide sulfurique concentré et de catalyseurs: le carbone s'élimine sous forme de CO2, l'hydrogène sous forme de H2O et l'azote reste en solution sous forme de NH4 (... ) Extraits [... ] TP: Détermination de la teneur en protéines par détermination de la teneur en azote total Méthode de Kjeldahl Dans ce TP, nous avons analysé du pâté de campagne et du camembert. Tout d'abord, il faut minéraliser la matière organique pour transformer l'azote organique qui se trouvait dans les protéines en azote minéral. [... Dosage des protéines du lait par la méthode de kjeldahl mi. ] [... ] [H2SO4] x (Vech Vsach) donne donc la quantité en mol de NH3 dans l'échantillon.
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Dosage Des Protéines Du Lait Par La Méthode De Kjeldahl Pdf
L'
acide
sulfurique étant en excès, on a:
2 NH3 + H2S04
2 NH4+ + SO42L'
azote total est donc obtenu sous la forme minérale NH4+ (ion ammonium). Au cours de la minéralisation, l'
acide sulfurique est partiellement décomposé et réduit en
S02 et S03 qui forment des fumées blanches irritantes et toxiques. Dosage des protéines du lait par la méthode de kjeldahl pdf. Il faut effectuer la minéralisation sous une hotte ou sur une rampe de minéralisation
munie d'un système permettant de capter ces vapeurs. L'
utilisation d'
un mélange de catalyseurs permet d'
avoir une minéralisation plus rapide
-
K2SO4 permet d'
élever la température d'
ébullition de l'
acide sulfurique à 350-400°
C; on peut ainsi effectuer la minéralisation à ces températures sans avoir de pertes
trop importantes d'
acide sous forme de vapeurs;
CuSO4 est le catalyseur de minéralisation proprement dit: il augmente la vitesse de
la minéralisation. 2. DOSAGE DE L'AZOTE TOTAL
Après minéralisation, l'
azote se trouve dans le minéralisat sous forme de NH4+. Le dosage
de l'
azote total est un dosage acide-base.
Dosage Des Protéines Du Lait Par La Méthode De Kjeldahl Mi
La méthode du biuret est une méthode de dosage colorimétrique des protéines. Principe [ modifier | modifier le code]
Complexe entre le cuivre alcalin et les liaisons peptidiques
En milieu alcalin, les protéines qui possèdent au moins 4 liaisons peptidiques forment avec les ions cuivre II (Cu 2+) un complexe bleu-violet dont l'intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration en protéines. Dosage proteines par kjeldahl. Cette coloration varie également en fonction de la nature des protéines à doser, de l'alcalinité du milieu, de la concentration en sulfate de cuivre et de la température. Un dosage colorimétrique est donc possible à 540 nm. Le réactif de coloration utilisé est le réactif de Gornall, composé:
de sulfate de cuivre, qui donne la coloration bleu du réactif due aux ions cuivre à 3 mmol/L;
d'une solution d' hydroxyde de sodium (soude) à 0, 2 mol/L, qui rend le milieu basique;
de tartrate double de sodium et de potassium, qui « chélate » (piège) les ions Cu 2+ et évite leur précipitation en milieu alcalin sous forme d' hydroxyde de cuivre Cu(OH) 2 insoluble;
d' iodure de potassium, pour éviter la réduction des ions cuivriques avant le dosage.
La conversion de TKN en protéine dépend du type de protéine présente dans l'échantillon et de la fraction de la protéine composée d'acides aminés azotés. Cependant, la gamme des facteurs de conversion est relativement étroite. Les exemples de facteurs de conversion, connus sous le nom de facteurs N, pour les aliments vont de 6, 38 pour les produits laitiers et 6, 25 pour la viande, les œufs et le maïs à 5, 70 pour la farine de blé et à 5, 46 pour les arachides. ISO - ISO 8968-1:2014 - Lait et produits laitiers — Détermination de la teneur en azote — Partie 1: Méthode Kjeldahl et calcul de la teneur en protéines brutes. Le secret d'une détermination correcte de TKN
Dans la plupart des cas, la clé du succès d'une analyse Kjeldahl peut être l'étape de préparation de l'échantillon (avant l'étape de digestion). Cette méthode n'est peut-être pas la plus rapide à utiliser, mais grâce sa grande fiabilité, elle donnera toujours des résultats satisfaisants lorsqu'elle est effectuée correctement (et en suivant les normes).
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