Les grains très fins (qualité superfine) sont
Chimie organique
1981 mots | 8 pages
c'est-à-dire le volume de phase mobile externe aux granules du gel dans la colonne et reliés à des tubes capillaires pour rendre les pics plus précis. Il existe différents types de gels dans les colonnes. Les plus fréquents sont les gels hydratés, dont le Séphadex et le Sépharose. EXPLIQUER? Ce sont des polysaccarides de type dextran. Il existe aussi les gels permanents qui ajoutent des effets d'absorption au tamisage des molécules. Ces gels permanents sont des minéraux ou des copolymères organiques. Ainsi
Tp immunoglobuline g
2864 mots | 12 pages
préparations sont centrifugées à 7000 rpm pendant 15 minutes à 4°C. Molécules, taille. Techniques chromatographie, dialyse , ultracentrifugation. Les surnageants sont éliminés, les 3 culots sont séchés avant d'être remis en suspension dans 0, 5 mL de Tampon 1. La fraction F1 est ainsi préparée. 2. Dessalage par filtration sur Sephadex G25
La colonne PD10 (fournit par la professeur) est équilibrée avec 30 mL de tampon 1 (1X). Une fois que le tampon pénétre dans le gel, 0, 5 mL de F1 sont déposés sur le gel et entrent dans la colonne.
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Tp Chromatographie D Exclusion Sur Gel Sephadex G-50
Les grosses molécules (dont le diamètre est supérieur à celui des pores) sont exclues et sont donc éluées les premières, au niveau du volume mort ( V m ou V 0). Les petites et moyennes molécules sont éluées plus tardivement, car incluses dans le gel, leur migration est freinée. Une molécule totalement incluse sera éluée avec un volume d'élution V* = V m + V i, où V i est le volume d'eau interne aux granules de gel(voir plus bas). Les solutés sont donc élués dans l'ordre inverse des masses moléculaires (voir figure ci-dessous). Figure 4: Elution des solutés dans l'ordre inverse des masses moléculaires. Tp chromatographie d exclusion sur gel sephadex y. Théorie de la chromatographie d'exclusion:
On considère une colonne de volume total V total remplie d'un gel solvaté:
V total = V 0 + V i + V g
V 0 = V m = volume d'eau externe aux granules
V i = volume d'eau interne aux granules
V g = volume du gel
Un soluté est distribué dans l'eau interne et l'eau externe selon un coefficient de distribution (de partage): K
si K = 0, le soluté est totalement exclu.
Tp Chromatographie D Exclusion Sur Gel Sephadex 3
II. Préparation des échantillons
4 solutions protéiques ont été préparées dans des tubes eppendorfs. Tp chromatographie d exclusion sur gel sephadex de la. La première contient 5uL de marqueurs de masse moléculaire, permettant par la suite, à la détermination du poids moléculaires des protéines présentes dans les autres solutions. Les marqueurs présents sont les suivants: β galactosidase (116 kDa), l'albumine (66, 2kDa), l'ovalbumine (45kDa), anhydrase carbonique (35kDa), cytochrome... Uniquement disponible sur
- Première: Calculer la quantité (masse) de chacun des produits déposés sur la colonne (présent dans le mélange initial). Je comprend qu'il faut calculer la masse de cytochrome c, dichromate de potassium et thyroglobuline présents dans les 200micro litres de tampon d'élution du début mais ce que je ne comprend pas c'est cmt y parvenir? J'essaie de m'aider des indications 5mg/mL, 2, 5mg/ ca ne me donne rien de concluant. Je ne vois pas quoi utiliser comme formule ni même comme donnée. Ce qui me bloque par la suite. Tp chromatographie d exclusion sur gel sephadex g-50. - Deuxième question: Calculer le rendement de purification du cytochrome c après passage dans la colonne. Il faut utiliser la formule: (quantité totale récuperée / quantité initiale)*100. Or il me faut la quantité initiale du coup!.. si qqun peut m'aider à trouver la réponse au moins à la première question ca m'aiderai beaucoup!
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Caractéristiques du produit Avec couvercle
Pratique
Indispensable
Réf. : 10000436480
Couleur(s):
rouge, transparent, bleu, vert
Matière détaillée:
Polypropylène
Dimensions:
L 26 cm x l 22. 6 cm x H 4 cm
Contenance - Volume (L):
0. 0
Poids (Kg):
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