Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Cryofracture (= fracture congélation) Fig 9-33 La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Cryofracture (= fracture congélation) Cryodécapage Cryofracture Cryofracture + décapage Cryofracture + décapage Fig 9-34 Elektronenmikroskopische Aufnahme der geschichtet gebauten Zellwand eines Gameten. Das Präparat wurde nach einem von J. E. HEUSER erarbeiteten Orci, L2002(fig3) Bordure en brosse d'une cellule épithéliale de tubule proximal de rein La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Cryofracture (= fracture congélation) Cryodécapage Coloration négative Fig 9-35 Filaments d'actine en coloration négative Fig 9-36 (AB) Fig 9-36 (C) Structure 3-D de la sous-unité 70 S du ribosome de E coli en TEM (Tomographie Electron Microscopy) Fig 9-37
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87e-001 TorrOriginal Magnification = 1. 07 kXAccelerating Voltage = 25 kV MEB La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Fig 9-32 La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration.
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Le microscope électronique à balayage fournit des images en relief des objets observés (ici, une tête de fourmi). © DR Le microscope électronique à balayage est un microscope électronique qui permet de visualiser des objets en relief. Technique du microscope électronique à balayage Le microscope électronique à balayage (MEB ou SEM en anglais pour scanning electron microscopy) utilise un fin faisceau d' électrons, émis par un canon à électrons. Des lentilles électromagnétiques permettent de focaliser le faisceau d'électrons sur l'échantillon. L'interaction entre les électrons et l'échantillon provoque la formation d' électrons secondaires de plus faible énergie. Ils sont amplifiés puis détectés et convertis en un signal électrique. Ce processus est réalisé en chaque point de l'échantillon par un balayage du microscope. L'ensemble des signaux permet de reconstruire la typographie de l'échantillon et de fournir une image en relief. La préparation des échantillons est contraignante. Ils doivent être déshydratés puis subir un traitement pour devenir conducteur (fixation des tissus, nettoyage).
Cryo-ultrotomie Fig 9-23 Fig 9-24 Fig 9-25 Immuno enzymo ME Fig 9-26 Fig 9-26 Localisation de protéines en ME La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope: résolution = 2 nm l 'échantillon: fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration.
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Un jouet à empiler classique de Micki sous la forme d'un ours mignon en bois,
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